Investigadora principal: María Rosa Ponce
Investigadores: Verónica Aguilera Díaz.
Instituto de Bioingeniería. Universidad Miguel Hernández.

Identificación de nuevos elementos de la ruta de los microARN implicados en el control del desarrollo de Arabidopsis thaliana

La represión postranscripcional mediada por microARN (miARN) se ha incorporado recientemente al inventario de los mecanismos de regulación de la expresión génica que participan en el control del desarrollo de los eucariotas pluricelulares. En la planta modelo Arabidopsis thaliana, uno de los componentes de la maquinaria de los miARN es el producto del gen ARGONAUTE1 (AGO1), cuyos alelos mutantes ago1 perturban numerosos aspectos del desarrollo y en muchos casos causan letalidad o esterilidad. Hemos aislado dos mutantes viables y moderadamente fértiles, ago1-51 y ago1-52, y obtenido sus dobles mutantes con alelos de otros genes de la maquinaria de los miARN y de alguna de sus dianas. Todos los dobles mutantes manifestaron sinergia fenotípica, tal como cabía esperar de la relación funcional entre las mutaciones implicadas. Lo anterior nos movió a buscar interacciones sinérgicas en muchos dobles mutantes derivados de cruzamientos entre ago1-52 y otros mutantes previamente obtenidos y escasamente estudiados. También hemos mutagenizado semillas ago1-52 con metanosulfonato de etilo, para realizar una búsqueda de mutaciones modificadoras de su fenotipo. Además, hemos llevado a cabo análisis de micromatrices de varios mutantes aislados en nuestro laboratorio, afectados en genes de la maquinaria de los miARN. Hemos identificado así varios centenares de genes cuya expresión está alterada de modo similar en los mutantes analizados, algunos de los cuales son dianas de los miARN presuntas o demostradas, y otros no han sido estudiados ni habían sido predichos in silico.

Proponemos un abordaje genético y molecular a la identificación de nuevos elementos de la ruta de los miARN, implicados en el desarrollo de Arabidopsis thaliana. Pretendemos (a) usar los mutantes que hemos identificado para clonar posicionalmente y caracterizar funcionalmente al menos uno de los genes modificadores del fenotipo del mutante ago1-52, y (b) demostrar experimentalmente que varios de los genes sobreexpresados en nuestras micromatrices son nuevas dianas de miARN, así como identificar a éstos últimos.