GV PROMETEO/2009/112 (2009-2013)

Investigador principal: José Luis Micol.
Investigadores: María Rosa Ponce.
Investigadores en formación: Ana Belén Sánchez García.
Instituto de Bioingeniería, Universidad Miguel Hernández.

Clonal

Análisis clonal de los efectos de mutaciones letales embrionarias sobre el desarrollo vegetativo de Arabidopsis

El genoma de Arabidopsis thaliana contiene centenares de genes que son aparentemente necesarios para el desarrollo embrionario y/o gametofítico, cuyas mutaciones de pérdida de función descritas hasta ahora causan letalidad. Aunque muchos de los genes letales embrionarios se expresan también en otras etapas del desarrollo de la planta, sus funciones postembrionarias no pueden estudiarse mediante métodos convencionales, dado que los mutantes mueren en estadios tempranos. Para intentar resolver este problema puede emplearse el análisis clonal, que posibilita el estudio del fenotipo de las mutaciones letales embrionarias en grupos de células de plantas adultas. Son abordajes alternativos la siembra masiva de semillas de genotipo letal, con la esperanza de encontrar algún escaper que haya superado la fase fenocrítica en la que resulta esencial la función del gen a estudio; la síntesis de moléculas de microARN artificiales (amiARN) diseñadas contra el gen a estudio, cuya expresión se verá inhibida en diferentes grados en diferentes líneas transgénicas portadoras del mismo transgén productor de amiARN; y por último, también puede resultar útil la obtención de una amplia serie alélica del gen a estudio, con la esperanza de que alguno de los alelos produzca una insuficiencia de función leve, que no cause letalidad embrionaria. Aplicaremos estas cuatro estrategias en este proyecto.